Venner, der laver cellerelaterede eksperimenter, skal ofte bruge cellefrysningsmetoder. Kort sagt er cellefrosset opbevaring at gemme celler i et miljø med lav temperatur for at opnå formålet med langtidsbevaring. Celler vil have en vis grad af mutation under transmissionsprocessen. For at sikre, at cellerne stadig kan bruges i tilfælde af celleforurening og mutation, bruges nogle celler normalt til frysning.
Princippet om cellefrosset
Et princip i processen med nedfrysning og genvinding af celler er "langsom frossen fusion" for at spare cellernes vitalitet maksimalt. Kort sagt skal den være langsom, når den fryses og afkøles, og den skal opvarmes hurtigt, når den genvindes fra lav temperatur. Grunden til langsom frysning er, at hvis cellerne placeres direkte i et miljø med ultralav temperatur som flydende nitrogen, danner cellerne en stor iskrystal, som vil beskadige cellerne.
Hvis du fryser det langsomt, kan cellerne dehydreres langsomt for at opnå formålet med at beskytte cellerne. Derudover er det også for at forhindre, at små iskrystaller danner store iskrystaller, det vil sige de tunge krystaller af iskrystaller. Derfor, når alle normalt laver cellefrysning, får det altid celler til at lide tab, hvilket sandsynligvis vil have en indvirkning i trinnet med frysning.
Flere metoder til cellefrysning
Manuel metode: Celle frosset opbevares normalt i flydende nitrogen. Den manuelle betjeningsmetode er at afkøle gradienten i køleskabet. Gem cellerne i det frosne opbevaringsrør, og sæt dem i et køleskabsmiljø på 4 grader C, -20 grader C, -80 grader C i rækkefølge. Frosset i 24 timer ved -80 grader C før overførsel til flydende nitrogen. Manuel køling kræver ikke yderligere tillæg af andre forbrugsstoffer. Den kan betjenes manuelt. Det er det enkleste, men det er ikke enkelt. Selve operationen er besværlig. Og effekten er ikke særlig god, for denne kølemetode er stadig ikke ensartet, og den er ikke nødvendigvis anvendelig til mere skrøbelige celler.
Gradientkøleboks: Gradientkøleboksen, der sælges på markedet, bruges specielt til ensartet køling af fryseprocessen. Kølehastigheden er normalt -1 grad/minut. Sæt det frosne opbevaringsrør i gradientkøleboksen, og placer gradientkøleboksen direkte i køleskabsmiljøet på -80 grader C for at overnatte uden manuel gradientbetjening. Sænk derefter depotrøret og læg det i flydende nitrogen. Effekten af at bruge gradient kølebokse er bedre, fordi kommercielle kølebokse på markedet kan sikre en nogenlunde ensartet kølehastighed.
Der er to almindelige gradient kølebokse på markedet. Et behov for at tilføje isopropyl, normalt en PC-boks. Ved brug tilføjes isopenol til skaleringslinjen i kassen, når den bruges. Isopropanolen bruges som bærer til varmelagring og distribution.
En anden slags behøver ikke at tilføjes med isopropyl, skum, og fryseren kan placeres direkte under brug, hvilket er mere bekvemt at betjene.
Køleboksen med isopropanol anbefales til at udskifte væsken efter at have brugt den flere gange, men fordi isopropanol er en skadelig væske, som skader forsøgene og miljøet, kan den som regel bruges flere gange. Det er dog nødvendigt at sikre, at væsken er i en vis mængde.
Ikke-programmeret frossenopbevaring: Brug ikke-programmerede frosne væsker, der kan købes på markedet. Sammenlignet med den traditionelle frosne væske kan den indre komponent reducere skaden på cellerne i iskrystallen, så der ikke er behov for at bruge gradienten til at køle ned, og det kræver heller ikke gradientkøleboksen. Frost opbevaring kan placeres direkte i et køleskabsmiljø på -80 grader C.
Mange celleprøver er meget værdifulde. Udover os skal vi bruge det, når vi laver eksperimenter. Du skal også vælge gode produkter så meget som muligt i relateret produktudvalg. Vælg det frosne opbevaringsrør med kvalificeret kvalitet, prøv at bruge gradientkøleværktøjet til frysning og maksimer garantien for lav skade på celler for at undgå små tab på grund af mindre.